Экспериментальные исследования по поджелудочной железе
У животных контрольной группы (интактных) строение поджелудочной железы соответствовало видовой норме: панкреатические дольки образованы многочисленными панкреатическими ацинусами (экзокринная часть поджелудочной железы) с секреторными отделами и вставочными протоками (рис. 4.14).
Рис. 4.14. Ацинусы в экзокринной части поджелудочной .железы интактного животного.
Окраска гематоксилином и эозином, х 600
В экзокринной части железы визуализируются выводные протоки -вставочные, внутридольковые, междольковые. В междольковых перегородках, образованных соединительной тканью, хорошо выявляются кровеносные сосуды и немногочисленные междольковые выводные протоки (рис. 4.15).
Рис. 4.15. Междольковый выводной проток в паренхиме поджелудочной железы.
Окраска гематоксилином и эозином, х 150
Эндокринная часть представлена островками поджелудочной железы округлой формы, образованными эндокриноцитами, недифференцируемыми по типам при обычных методах гистологического окрашивания. В них отчетливо визуализируются кровеносные капилляры синусоидного типа.
При пероральном приеме Римадил Р (карпрофена) в течение 21 дня в терапевтической дозе (4 мг/кг) у 60 % (п=3) животных мы наблюдали выраженное полнокровие кровеносных сосудов поджелудочной железы (рис. 4.16). У одного животного (20%) отмечался умеренный отек межацинарной соединительной ткани (рис. 4.17).
Рис. 4.16. Выраженное полнокровие сосудов в поджелудочной железе.
Окраска гематоксилином и эозином, х 600
Рис. 4.17. Умеренный отек межацинарной соединительной ткани в поджелудочной железе.
Окраска гематоксилином и эозином, х 600
В паренхиме железы у 60 % животных группы выявляются ограниченные участки белковой (вакуольной) и жировой дистрофии экзокриноцитов, нарушающие нормальную структуру ацинусов (рис. 4.18), фиброз междольковой соединительной ткани (20 %).
Рис. 4.18. Участок вакуольной и жировой дистрофии экзокриноцитов в поджелудочной
железе. Окраска гематоксилином и эозином, х 600
В 40% случаев отклонений от нормы при проведении гистологического исследования поджелудочной железы в этой экспериментальной группе не выявлено.
При проведении гистологического исследования поджелудочной железы животных, получавших в течение 21 дня Римадил Р в дозе, в два раза превышающей терапевтическую (8 мг/кг), в поджелудочной железе всех животных (100 %) отмечалось полнокровие кровеносных сосудов (рис. 4.19).
Рис. 4.19. Полнокровные артерия и вена в паренхиме поджелудочной железы животного, получавшего Римадил Р в дозе 8 мг/кг. Окраска гематоксилином и эозином, х 150
В паренхиме поджелудочной железы у трех из четырех животных группы (75 %) выявлена вакуольная дистрофия и некроз экзокриноцитов (рис. 4.20, 4.22, 4.23) с нарушением структуры ацинусов — также у 75 % животных (рис. 4.21). В местах некроза отмечались реактивные процессы в ткани железы — появление двуядерных клеток (рис. 4.20).
Рис. 4.20. Белковая (вакуольная) дистрофия экзокриноцитов и появление большого количества двуядерных клеток. Окраска гематоксилином и эозином, х 600
Рис. 4.21. Деструкция ацинусов в паренхиме поджелудочной железы.
Окраска гематоксилином и эозином, х 600
Рис. 4.22. Участок тотального некроза в паренхиме поджелудочной железы.
Окраска гематоксилином и эозином, х 600
Рис. 4.23. Обширные участки дистрофии и некроза в паренхиме поджелудочной железы.
Окраска гематоксилином и эозином, х 150
У двух животных (50 %) выявляли фиброз междольковой соединительной ткани в паренхиме железы (рис. 4.24).
Рис. 4.24. Фиброз междольковой соединительной ткани в паренхиме поджелудочной железы.
Окраска гематоксилином и эозином, х 600
При проведении гистологического исследования поджелудочной железы животных, получавших в течение 21 дня Римадил Р в дозе, в 5 раз превышающей терапевтическую (20 мг/кг), в паренхиме железы помимо полнокровия крупных сосудов в 100 % случаев выявлялись выраженный отек межацинарной и междольковой соединительной ткани (рис. 4.25), обширные участки вакуольной дистрофии экзокриноцитов и обширные по площади участки некроза (рис. 4.27) с нарушением структуры ацинусов. По периферии зон некроза выявляли большое количество двуядерных клеток (рис. 4.28).
Также мы наблюдали формирование склероза (фиброза) междольковой соединительной ткани поджелудочной железы (рис. 4.26).
Рис. 4.25. Ограниченный участок вакуольной дистрофии в паренхиме поджелудочной железы с нарушением структуры ацинусов. Окраска гематоксилином и эозином, х 600
Рис. 4.26. Выраженный отек и фиброзные изменения междольковой соединительной ткани в паренхиме поджелудочной железы животного, получавшего Римадил Р в дозе 20 мг/кг.
Окраска гематоксилином и эозином, х 150
Рис. 4.27. Тотальный некроз в паренхиме поджелудочной железы животного, получавшего Римадил Р в дозе 20 мг/кг. Окраска гематоксилином и эозином, х 150
Рис. 4.28. Тотальный некроз паренхимы поджелудочной железы, большое количество двуядерных экзокриноцитов. Окраска гематоксилином и эозином, х 600
Рис. 4.29. Тотальный некроз паренхимы поджелудочной железы, фиброз междольковой
соединительной ткани. Окраска гематоксилином и эозином, х 600
При проведении гистологического исследования поджелудочной железы животных, получавших в течение 21 дня Римадил Р в дозе, в 10 раз превышающей терапевтическую (40 мг/кг), в паренхиме железы в 100 % случаев выявлялись обширные участки вакуольной дистрофии экзокриноцитов и обширные по площади участки некроза (рис. 4.30, 4.31) с нарушением структуры ацинусов, появление двуядерных клеток (рис. 4.33). Также отмечались массивные кровоизлияния в паренхиму железы, полнокровие не только крупных сосудов, но и гемокапилляров (рис. 4.30, 4.32), фиброзные изменения соединительной ткани железы.
Необходимо отметить, что ни в одной из предыдущих групп, как и в этой, мы не отмечали изменения эпителия выводных протоков (рис. 4.31).
Рис. 4.30. Участок вакуольной дистрофии и некроза в паренхиме поджелудочной железы,
полнокровный капилляр. Окраска гематоксилином и эозином, х 600
Рис. 4.31. Некроз поджелудочной железы, неизмененный внутридольковый выводной проток.
Окраска гематоксилином и эозином, х 600
Рис. 4.32. Обширные участки некроза поджелудочной железы, массивное кровоизлияние
в паренхиму. Окраска гематоксилином и эозином, х 150
Рис. 4.33. Дистрофия и некроз экзокриноцитов, двуядерные клетки.
Окраска гематоксилином и эозином, х 600
В целом, патоморфологические изменения в паренхиме поджелудочной железы животных опытных групп выглядели следующим образом (рис. 4.34.).
Таблица 4.2
Гистопатологические изменения в паренхиме поджелудочной железы
у животных опытных групп
Признак | Доза 4 мг/кг (п=5), % животных в группе | Доза 8 мг/кг (п=4), % животных в группе | Доза 20 мг/кг (п=2), % животных в группе | Доза 40 мг/кг (п=2), % животных в группе |
Полнокровие сосудов | 60 | 100* | 100* | 100* |
Вакуольная дистрофия | 60 | 75 | 100* | 100* |
Некрозы | — | 75* | 100* | 100* |
Двуядерные клетки | — | 75* | 100* | 100* |
Нарушение структуры ацинусов | 60 | 75 | 100* | 100* |
Признак | Доза 4 мг/кг (п=5), % животных в группе | Доза 8 мг/кг (п=4), % животных в группе | Доза 20 мг/кг (п=2), % животных в группе | Доза 40 мг/кг (п=2), % животных в группе |
Жировая дистрофия | 60 | — | — | — |
Отек межацинарной и междольковой соединительной ткани | 20 | — | 100* | — |
Фиброз междольковой соединительной ткани | 20 | 50* | 100* | 100* |
Кровоизлияния в паренхиму железы | — | — | — | 50* |
Белковые массы в просвете протоков | — | — | — | — |
Десквамация эпителия протоков | — | — | — | — |
*р
Отек межацинарной и междольковой соед ткани
Рис. 4.34. Патоморфологические изменения в поджелудочной железе животных опытных групп (в %)
Таким образом, мы наблюдали при введении животным Римадил Р (карпрофена) отчасти те же изменения в поджелудочной железе, что и при введении нимесулида: появление белковой и жировой дистрофии экзокриноцитов, некрозы, реактивную гипертрофию экзокриноцитов в зонах некроза с появлением двуядерных клеток. Однако наблюдались и существенные отличия: при длительном приеме Римадил Р отмечался не фокальный, а тотальный некроз паренхимы поджелудочной железы, выраженные
с;
сосудистые расстройства, которые при длительном введении относительно малых доз Римадил Р проявляли себя не только как стаз крови в крупных сосудах, но и появлением межацинарного отека соединительной ткани железы. При длительном приеме более высоких доз препарата отмечался выраженный отек не только межацинарнои, но и междольковой соединительной ткани, а также кровоизлияния в паренхиму железы в местах обширных некрозов. То есть, изменения, выявленные в поджелудочной железе животных, длительное время получавших Римадил Р, соответствовали не хроническому, а острому панкреатиту.
При небольших дозировках морфологическая картина соответствовала серозно-инфильтративной (отечной) форме, при высоких — наблюдался панкреонекроз — геморрагический мелкоочаговый, крупноочаговый,
субтотальный или негеморрагический мелкоочаговый, крупноочаговый, субтотальный панкреонекроз.
Что касается выявления тучных клеток, которые мы находили у животных, получавших нимесулид в различных дозах, в большом количестве не только в окружающей поджелудочную железу соединительной и жировой ткани, но и паренхиме железы, то в группах, получавших Римадил Р, тучные клетки в небольшом количестве были замечены в окружающей железу соединительной и жировой ткани только в группе, получавшей максимальную дозу препарата (рис. 4.35.).
Рис. 4.35. Тучная клетка со светлым ядром и неоднородной цитоплазмой в окружающей поджелудочную железу соединительной ткани крысы, получавшей Римадил Р в дозе 40 мг/кг.
Окраска гематоксилином и эозином, х 600
- 40 мг/кг
- 4 мг/кг
8 мг/кг
Полнокровие
сосудов
Бакуольная дистрофия
Некрозы
Двуядерные клетки
Нару шение структуры ацинусов
Жировая дистрофия
Полученные данные позволяют рекомендовать разработанные
экспериментальные модели к использованию в повседневной
патофизиологической и фармакологической практике и подтверждают развитие патологии застенных пищеварительных желез при длительном приеме нестероидных противовоспалительных препаратов. На основании исследования нестероидных противовоспалительных препаратов с разными механизмами действия было обнаружено, что при длительном применении они вызывают разнонаправленные патологические изменения в поджелудочной железе. Полученные данные требуют более детального изучения, базирующегося на изучении патогенеза поражения поджелудочной железы при приеме НПВП.
Источник
В экспериментах на животных воспроизведены многие существенные стороны клинической патологии поджелудочной железы, в частности различные формы острых и хронических панкреатитов, панкреонекрозы, нарушения внутрисекреторной и внешнесекреторной функций поджелудочной железы. Существенный интерес представляет возможность изолированного повреждения различных функциональных элементов поджелудочной железы посредством специальных химических веществ, обладающих избирательной токсичностью. Деструкция (Б-клеток, продуцирующих инсулин, может быть вызвана аллоксаном,повреждение А-клеток, продуцирующих глюкагон, — введением солей кобальта. Нарушение экзокринного аппарата может быть достигнуто введением ряда веществ, из которых наиболее широко применяется этионин. Такой же результат дает перевязка протоков поджелудочной железы, вызывающая полную атрофию экзокринного аппарата и не влияющая на внутрисекреторную функцию поджелудочной железы. Ниже приведены наиболее употребительные приемы воспроизведения заболеваний поджелудочной железы в эксперименте.
Непосредственная механическая или химическая травма поджелудочной железы достигается введением альтерирующего агента в ткань железы (очаговые повреждения) или в протоки (диффузные повреждения). Чаще всего альтерирующими агентами служат желчь, кишечный сок, соли кальция, гипертонические растворы, трипсин, энтерокиназа. Все они первично или вторично вызывают активацию панкреатических протеаз. Патологические изменения функционального и структурного характера возникают при нарушении регионарного кровообращения в эксперименте, которое может быть вызвано введением в сосуды поджелудочной железы склерозирующих агентов, искусственных эмболов (воздух, ликоподий, жиры, нагретый парафин, пластмасса), перевязкой магистральных артериальных и венозных сосудов. Моделирование воспалительных процессов поджелудочной железы инфекционного происхождения достигается введением бактериальных культур через проток. Необходима предварительная перевязка главного протока ниже намеченного места инъекции и дополнительного протока. В эксперименте чаще всего используют культуры кишечной палочки, стрептококка и стафилококка. Одновременная механическая или химическая травма протоков нацинарной ткани резко утяжеляет течение заболевания. Введение в протоки поджелудочной железы стафилококкового токсина вызывает нарушения, сходные с теми, которые описаны при введении стафилококковой культуры. Тяжелые поражения поджелудочной железы возникают как результат местной аллергической реакции. Сравнительно недавно описаны два способа их получения у кроликов:
1) сенсибилизирующая доза антигена вводится в кровь, разрешающая — в протоки поджелудочной железы;
2) сенсибилизирующая доза антигена вводится в протоки поджелудочной железы, разрешающая — в кровь. После введения разрешающей дозы отмечаются значительные деструктивные изменения и нарушение кровообращения.
Все перечисленные приемы сопряжены с оперативным вмешательством на поджелудочную железу, что заметно снижает ценность методики.
В последнее время широкое применение получают вещества, вызывающие нарушение определенных звеньев обмена поджелудочной железы. Из них наиболее часто используется этионин (аналог метионина), который при введении через рот, подкожно, внутримышечно, внутривенно или внутрибрюшинно нарушает синтез белков, тормозя включение в состав последних метионина и глицина. Небольшие дозы этионина вызывают проходящие функциональные сдвиги. При увеличении дозы в поджелудочной железе обнаруживаются деструктивные процессы вплоть до панкреонекроза. Такие же патологические изменения могут быть получены введением четыреххлористого углерода, 2-хлорадено-зина, пропилтпоурацила и др. Недостатком всех этих приемов является весьма относительная избирательность упомянутых веществ (так, при введении этионина, хотя и в меньшей степени, чем поджелудочной железе, страдают другие пищеварительные железы); крупным достоинством является простота эксперимента, отсутствие необходимости в оперативном вмешательстве и возможность варьировать степень поражения поджелудочной железы в зависимости от дозы вводимого вещества.
Значительные функциональные и структурные нарушения обнаружены при перерезке блуждающих или чревных нервов на фоне усиленной работы поджелудочной железы, вызванным введением неочищенного секретина (секретин -4- панкреозимин) или жировой диетой. Интересно, что хроническое раздражение этих же нервов и солнечного сплетения (создаваемое введением в соответствующий нерв кротонового масла, скипидара, взвеси угольного порошка или ликоподия) приводит к нарушениям, сходным с описанными при денервации. Нарушения функции поджелудочной железы описаны и при повреждениях различных участков гипоталямуса и при патологии высшей нервной деятельности. Экспериментально вызванные у собак срывы высшей нервной деятельности обусловливают обратимые функциональные расстройства различных органов; в поджелудочной железе они проявляются в виде гипо- или гиперсекреции. Наиболее значительные нарушения поджелудочной железы в эксперименте наблюдаются при сочетанном повреждении поджелудочной железы и аппаратов, регулирующих ее деятельность. По мнению большинства исследователей, независимо от причины, вызвавшей патологию поджелудочной железы, дальнейшее развитие заболевания связано с активацией панкреатических протеаз. Принято считать, что активированные внутри клеток поджелудочной железы трипсин и химотрипсин повреждают различные клеточные структуры, расщепляя их протеиновые компоненты. Это приводит к дальнейшим нарушениям функции поджелудочной железы вплоть до гибели клеточных элементов. Вследствие нарушения проницаемости создаются условия для проникновения ферментов за пределы секреторных клеток и повреждения белковых (протеиназами) и липоидных (липазой и лецитиназой) структур. Этим объясняется типичное для панкреатитов наличие геморрагии и жировых некрозов. Специфическим проявлением острых экспериментальных поражений поджелудочной железы является увеличение концентрации панкреатических ферментов (амилазы, липазы, трипсина, рибонуклеазы) в крови и моче. Такое повышение является следствием нарушения оттока секрета и повышения проницаемости экзокринных клеток. При изучении внешней секреции поврежденной поджелудочной железы обнаруживается нарушение типичного для каждого пищевого раздражителя хода секреторной кривой (увеличение и уменьшение продолжительности секреции и скрытого периода, обильное отделение сока в ответ на слабый пищевой раздражитель, скудное — на сильный и т. д.). Нередко наблюдается появление спонтанной секреции поджелудочной железы, значительное увеличение или уменьшение ферментов в поджелудочном соке. Большой интерес представляет изменение типичных соотношений между основными панкреатическими ферментами. Так, при действии этионина наблюдается резкое ослабление амилолитической и протеолитической активности на фоне практически неизмененной активности липазы. Аналогичные данные получены при изучении острых и хронических заболеваний поджелудочной железы у человека.
Взаимоотношение между ацинусами и островками. Как уже отмечалось выше, количество и размеры островков сильно варьируют. Преобладание в паренхиме поджелудочной железы многочисленных мелких островков может быть обозначено как м и-кронезия, в противоположность макронезии, означающей преимущественное наличие крупных островков. Изменение количества островков является наиболее частой реакцией, которая разыгрывается в поджелудочной железе в ответ на весьма разнообразные воздействия, испытываемые как этим органом, так и организмом в целом. В частности, быстрое и значительное увеличение количества островков наблюдается при перевязке выводных протоков поджелудочной железы, при воспалении ее паренхимы, а также в той части поджелудочной железы, которая оставлена после парциальной панкреатомии (однако, если удалить 70—80% поджелудочной железы, то островки в оставленной части претерпевают истощение вследствие чрезмерной нагрузки, что приводит к дегенерации В-клеток и развитию диабета). Столь легкое и быстрое новообразование островков ставит вопрос об источниках их возникновения. В свое время Лагесс, рассматривая островки как дегенеративную форму ацинусов, допустил возможность неограниченного превращения ацинусов в островки и обратно. Представление о переходе ацинусов в островки имеет и поныне сравнительно широкое распространение.
Трансформационные гипотезы базируются исключительно на внешних структурных признаках, интерпретируемых к тому же нередко без должной критики. Трансформация высокодифференцированной ацинарной клетки в писулярную, столь же высокоспециализированную, кажется маловероятной, тем более что в эмбриогенезе, как уже отмечалось выше, островки дифференцируются независимо от ацинусов, причем эндокринная функция поджелудочной железы начинается раньше, чем экзокринная. У плода, во-первых, островковая часть панкреатической паренхимы развита обильнее, чем ацинарная, а, во-вторых, если, например, в эксперименте у беременной собаки удалить поджелудочную железу, то нарушения углеводного обмена у матери остаются невыраженными, но после родов развивается тяжелый сахарный диабет. Отсюда следует, что зародышевая поджелудочная железа не только продуцирует инсулин, но даже количества последнего настолько велики, что достаточны для предотвращения диабета у панкреатомированной матери.
В то же время многочисленные наблюдения с полной отчетливостью показывают, что источником возникновения новых островков может являться недифференцированный эпителий мелких выводных протоков и особенно вставочных отделов. Так, например, при перевязке выводных протоков или при вызывании асептического воспалительного процесса в поджелудочной железе обнаруживается, с одной стороны, отчетливая дегенерация ацинарной паренхимы, а с другой — интенсивная пролиферация эпителия протоков и вставочных отделов, дающая начало эпителиальным тяжам и почкам, которые постепенно дифференцируются в новые островки, повторяя, таким образом, процесс эмбрионального развития последних.
Источник
