Трипсин 1 250 из поджелудочной железы свиньи

•   Описание
•   Характеристики

•   Описание
•   Характеристики

Соседние файлы в папке Ответы по билетам

• #
• #
• #
• #
• #
• #
• #
• #
• #
• #
• #

ТОП 10:

Инсулин — гормон поджелудочной железы, белок (2 цепи), кот. вырабатывается B-клетками островков Лангерганса. Изготавливают из поджелудочной железы рогатого скота и свиней. Получение инсулина состоит из следующих стадий:

1. Измельчение замороженных поджелудочных желёз и дважды экстракция (бисмацерация) кислым спиртовым р-ром (спирт для инактивации трипсина).

2. Осаждение балластных белков при охлаждении на 48 ч. (рН 7,5) и освобождение от липидов.

3. Изоэлектрическое осаждение фракции инсулина (рН 5,5) и осаждение спиртом, ацетоном, эфиром.

4. Очистка инсулина: осаждение солями (цинка ацетат), фракционирование методами хроматографии, гель-фильтрации и др.

5. Осаждение инсулина в виде кристаллов.

6. Переосаждение цинк-инсулина.

7. Выпавшие кристаллы инсулина отделяют центрифугированием

8. Промывают последовательно холодной водой очищеной, ацетоном, эфиром

9. Досушивают на воздухе, в вытяжном шкафу, эксикаторе

Биолог. ак-ть определяют по способности понижать содержание сахара в крови у здоровых кроликов.

Номенклатура: Инсулин для инъекций (Insulinum pro injectionibus). Получают путем растворения кристаллического инсулина в воде. Суинсулин (Suinsulinum). Раствор кристаллического инсулина получаемого из поджелудочной железы свиней, в ацетатном буфере. Эффект через 15—20 мин после инъекции, продолжительность действия до 6 ч. Пролонгированные препараты инсулина: Суспензия инсулин-протамина для инъекций. Готовят из кристаллического инсулина с добавлением протамина сульфата и натрия фосфата двузамещенного. Эффект наступает ч/з 2—4 ч после инъекции и продолжается 16—18 ч.

Суспензия цинк-инсулина аморфного для инъекций. Это стерильная суспензия инсулина с хлоридом цинка в буферном (ацетатном) р-ре. Эффект ч/з 1—1,5 ч, продолжается 10—12 ч. Суспензия цинк-инсулина для инъекций. Стерильная суспензия цинк-инсулина аморфного и цинк-инсулина кристаллического (3:7) в ацетатном буфере. Эффект наступает ч/з 2—4 ч, умеренно усиливается, достигает максимума ч/з 8—10 ч и продолжается 20 — 24 ч. Протамин цинк-инсулин для инъекций. Получают прибавлением к р-ру кристаллического инсулина р-ра протамина сульфата цинка хлорида и фосфата натрия. Эффект ч/з 3—6 ч после введения и продолжается 24—36 ч. Суспензия цинк-инсулина кристаллического для инъекций. Стерильная суспензия инсулина с хлоридом цинка в буферном (ацетатном) р-ре. Эффект ч/з 6—8 ч, всего продолжается 30—36 ч.

Препараты слизистой желудка

Пепсин — препарат, содержащий протеолитический фермент. Изготавливают из слизистой оболочки желудка свиней, где он образуется в виде профермента — пепсиногена. Пепсиноген активируется к-той хлороводородной и аутокаталитически, т. е. с помощью образовавшихся молекул пепсина. От пепсиногена сначала отщепляется остаточный полипептид, а затем ингибитор пепсина. Образуется активный пепсин. Основной задачей является получение пепсина в активной форме. Поэтому экстракцию сочетают с автолизом. Измельченные ткани заливают водой, подкисленной HCl рН 1,9—2,3 (10:1). Настаивание при 40 °С, перемешивая 8 ч и повторно — 24 ч. Лизаты сливают, отделяют от верхнего слоя жира, объединяют, процеживают. Ферментную массу выделяют высаливанием, для чего к лизату (значение рН 1,9—2,3) при непрерывном перемешивании доб. 20—25% р-р NaCl (Пепсин, выделившийся из р-ра, всплывает на поверхность). Его отделяют, сушат в вакуум-сушильном шкафу при температуре 35—40 °С, измельчают в фарфоровой шаровой мельнице и просеивают. Стандартизуют препарат по протеолитической активности (переваривание белка куриного яйца): 10 г протертого белка в присутствии 0,1 г препарата в стандартных условиях должны полностью растворяться ч/з 3— 4 ч, образуя опалесцирующий р-р. Применяют при расстройствах пищеварения, гастрит, диспепсия.

Сок желудочный натуральный. Получают по методу, предложенному И. П. Павловым, через фистулу желудка при мнимом кормлении собак или др. животных (лошадей). Препарат п.с. б/цв прозрачную жидкость кислого вкуса, консервированную к-той салициловой (0,03 — 0,04 % ). Применяют при недостаточной функции желез желудка.

Панкреатин, трипсин, химотрипсин.

Панкреатин. Препарат содержит фермент поджелудочной железы (трипсин, амилазу и в незначительном к-ве липазу). Ткани поджелудочной железы убойных животных измельчают на волчках и заливают водой, подкисленной к-той уксусной ледяной 5 мл на 1л воды. Настаивание проводят в реакторе с мешалкой 4 часа при t 10 С. Центрифугируют. В экстракте активируют ферменты создав рН 8,1, + CaCl2 + затравка — панкреатин. Настаивают 24ч при 5 °С. Экстракт подкисляют до pH 6,0 и осаждают сопутствующие в-ва. Осадок отделяют, обезжиривают ацетоном и высушивают в вакуум-сушильном шкафу при 40°С. Измельчают в шаровой мельнице. Стандартизуют панкреатин по протеолитической активности — способности переваривать белок казеин в слабощел. среде. Применяют при хронических панкреатитах с недостаточной ф-цией поджелудочной железы.

Трипсин, химотрипсин. Измельченную поджелудочную железу подвергают автолизу, для чего смешивают ее с половинным кол-вом воды и оставляют на 18ч при 12°С. Затем в реакторе с мешалкой проводят экстракцию методом бисмацерации водой, подкисленной к-той ортофосфорной рН 2,0—2,5, при не выше 5°С. Экстракты отделяют от жмыха центрифугированием и объединяют. Жмых используют для получения инсулина а из фильтрата высаливают ферменты различными концентрациями аммония сульфата (ДНКазу и РНКазу), добавляя кристаллический аммония сульфат до определеной степени насыщения при перемешивании и охлаждении. Фильтрат используют для получения химотрипсина, трипсина и пантрипина. Из фильтрата, содержащего комплекс ферментов, аммония сульфатом при степени насыщения 0,7 высаливают химотрипсин,трипсин и пантрипсин. Из смеси ферментов получают неактивный химотрипсиноген. Для этого осадок растворяют в воде, подкисленной кислотой серной до рН 3,0, при 5 °С и медленно доб. при перемешивании р-р аммония сульфата. Затем р-р подщелачивают 5н р-ром NaOH до рН 5,0 и выдерживают при комнатной температуре до полного осаждения кристаллического химотрипсиногена. Из фильтрата и промывных вод, полученных после отделения химотрипсиногена, выделяют трипсиноген высаливанием аммония сульфатом при подкислении 5 н серной кислотой до рН 3,5. Очистка индивидуальных ферментов продолжается несколько дней и состоит из ряда многокр. повторяющихся операций. Проводят 3-кр. высаливание ферментов аммония сульфатом до различной степени насыщения, изменения значения рН. Химотрипсиноген и трипсиноген активируют до образования химотрипсина и трипсина в соответствующих буферных р-рах при пониженной t и доб. кристаллика трипсина. Обессоливают ферменты диализом ч/з целлофановую пленку. Разбавленные р-ры фильтруют ч/з стерилизующие фильтры, разливают во флаконы и подвергают сублимационной сушке.

Применение: Оба применяются местно в виде аэрозолей для ингаляций, внутриплеврально, в/м при заболеваниях, сопровождающихся гнойно-некротическими процессами. Стандартизуются по значению рН.

Препараты желчи

Желчь медицинская консервированная или билиарин. Препарат, содержащий натуральную желчь убойного скота. Свежесобранную желчь фильтруют и на каждый литр профильтрованной желчи доб. смесь стабилизаторов, антисептиков и отдушки: спирта 96%, формалина или лизоформа, спиртового р-ра фурацилина, душистой эссенци. Смесь тщательно взбалтывают, после 3-суточной выдержки при комнатной температуре разливают в асептических условиях в стерильные флаконы и пастеризуют при температуре 60—63 °С в течение 1,5 ч. Применяют в виде компрессов как обезболивающее и рассасывающее ср-во при хронических артритах.

Аллохол. Содержат желчи сгущенной, экстракта чеснока густого, экстракта крапивы густого, угля активированного 0,025 г, вспомогательных в-в. Применяют при хронических гепатитах, холециститах.

Холагон. В состав препарата помимо сгущённой желчи входит экстракт коры жостера.

Препараты селезёнки

Спленин. Препарат получают из селезенки крупного рогатого скота. Технология получения: автолиз в холодильной камере при 5-6 С; измельчение мясорубкой; экстракция дихлорэтаном 8 суток; отгонка дихлорэтана в вакуум-выпарном аппарате при t не более 45С; К полученному остатку водного экстракта (5 л) прибавляют 1 л 70% спирта и при помешивании подогревают до 40 °С. Подогретую массу переносят в две 5-литровые бутыли с тубусом, прибавляют еще 0,5 л 70% этилового спирта и 1 кг петролейного эфира, взбалтывают 10 мин, после чего смесь отстаивается до разделения фракций. Спиртовую фракцию, содержащую спленин, сливают в емкость. Операцию повторяют 2-3 раза; отгон спирта из спиртовой фракции; водный остаток обрабатывают хлоридом натрия – высаливание; фильтрование и добавление зотонического р-ра NaCl и спирта для консервации; фильтрование; стерилизация ртутно-кварцевой лампой; ампулирование.

Применяют для лечения и профилактики токсикозов ранних сроков беременности, также для предупреждения и лечения лучевой болезни, гипопаратиреоза. Выпускают в ампулах по 1 мл.