Поджелудочная железа у цыплят
В.А. СТРЕЛЬЦОВ, Н.С. ТКАЧЁВА
ФГОУ ВПО «Брянская государственная сельскохозяйственная академия»
По внешнесекреторной функции поджелудочная железа является второй (после печени) крупной за стенной железой кишечника, с двойной (экзо- и эндокринной) функцией. Клетки экзокринной части вырабатывают пищеварительный сок с ферментами, которые по выводным протокам поступают в просвет двенадцатиперстной кишки. Ферменты(амилаза, липаза, химотрипсин, эластаза, ДНК-аза, РНК-аза, карбоксипептидаза и т.д.) расщепляют полимеры до мономеров, которые всасываются в кровь и лимфу (жир).
Клетки эндокринной части железы(островки Лангерганса) выделяют в кровь гормоны – инсулин, глюкагон, соматостатин. Инсулин и глюкагон являются определяющими факторами углеводного обмена (S.F. Beer, М.М. Birchamp, S.R. Bloometal., 1989), а дисфункция панкреатических остроровков вызывает глубокие повреждения многих органов (А.М. Уголев, 1978; И.М.Кветной. 1981). Без этой железы невозможна сама жизнь животного, ау птиц её атрофия приводит к патологии стенки тонкого кишечника(Б.Ф. Бессарабов. И.И. Мельникова, Н.К. Сушков, 2007).Интенсификация промышленного птицеводства требует постоянного углубления знаний о закономерностях морфологической организации систем организма птиц и гистохимических процессах в клетках органов, обеспечивающих основные жизненные явления (О.В. Костюк, И.В. Клименкова, Ф.Д. Гуков, 2003).Результаты исследований многих авторов относительно массы поджелудочной железы и её микроструктуры у птиц противоречивы. Наши исследования были направлены на изучение динамики морфологических и гистологических показателей поджелудочной железы у кур в возрастном аспекте.
Для исследований использовались клинически здоровые, датированные цыплята и взрослые куры яичного кросса «ИЗА-браун» клеточного содержания 1-, 14-, 35-, 85-, 120-, 150-, 280-, 420- и 525-суточного возраста эксплуатируемые на птицефабрике «Снежка» Брянской области. С каждой возрастной группы использовано по 6 голов. Всего было исследовано 54 головы птицы и столько же панкреатических желез. Перед проведением каждого исследования птицу взвешивали, посмертно осуществляли доступ к поджелудочной железе, измеряли массу и проводили морфометрию изучаемого органа. Для изучения гистостроения брали кусочки поджелудочной железы размером 1 см3, затем их фиксировали в 10%-ном растворе нейтрального формалина в течение 7-10 суток. После чего их промывали в проточной воде. Уплотнение материала проводили путём заливки в парафин. Срезы толщиной 5-8 мкм готовили на ротационном микротомеМПС-2. Депарафинирование срезов и их окрашивание для обзорного исследования проводили гематоксилином и эозином (О.В. Волкова, Ю.К. Елецкий, 1982).
Изготовленные гистопрепараты изучали с помощью световых микроскопов МБИ-1 (при объективе 20) и Jenamed-2(окуляр GF 10, объективы 20 и 40).Измерения структурных единиц поджелудочной железы проводили с помощью окуляр-микрометра МОВ1-15х.В результате исследований установлено, что поджелудочная железа кур кросса «ИЗА-браун» является полиморфным органом, состоящим из пяти анатомических структур: вентральной, дорсальной, средней, селезеночной долей и сращения, что дополняет и расширяет сведения о внешнем строении этого органа, содержащиеся в научной литературе. Вентральная доля располагается вдоль нисходящей ветви двенадцатиперстной кишки, соединяясь с последней связкой. Она выявлена у всех особей девяти возрастных групп. Ее масса увеличивается от0,03 г (у односуточных цыплят) до 1-49 (у 525-суточных кур). Длина этой доли у односуточных цыплят составляет 23,5 мм, в 525-суточномвозрасте птицы – 96,0 мм, ширина, соответственно, 2,56 мм и 5,2 мм, толщина – 1,23 и 2,3 мм. Дорсальная доля идет с восходящей ветвью двенадцатиперстнойкишки и соединяется с ней связкой. Эта доля имелась на всех препаратах. Ее масса в односуточном возрасте 0,03 г, в 525-суточном – 1,41 г, длина – 19,5 и 74,0 мм, ширина – 2,85 и 7,60 мм, толщина – 1,35 и 3,40мм, соответственно. Между вентральной и дорсальной долями на 36 препаратах (66,6%)имелась средняя доля. В односуточном возрасте птицы её масса была0,01 г. в 525-суточном – 1,14 г, длина составляла 20,3 и 80,3 мм, ширина – 2,5 и 4,6 мм, толщина – 1,3 и 3,2 мм, соответственно.
Селезеночная доля выявлена на 27 препаратах (50,0 %). Она отходит от краниального конца предыдущих долей в виде тонкого белого тяжа и доходит до селезёнки. Чаще всего она начиналась от вентральной доли на 14 препаратах (51,8 %), затем от средней на 10 препаратах(37,0 %) и в трёх случаях (11,2 %) – от дорсальной доли. Масса этой доли у односуточных цыплят была 0,004 г, у 525-суточных кур – 0,11г. Длина селезеночной доли у односуточных цыплят составляла 7,66мм, у 525-суточных кур – 21,0 мм, ширина – 0,4 и 2,1 мм, толщина –0,66 и 3,0 мм, соответственно. Сращение расположено на внутренней поверхности изгиба двенадцатиперстной кишки, то есть в месте перехода её нисходящей в восходящую петлю.
Она выявлена на 53 препаратах (98,2 %) из 54 исследованных, так как на одном препарате поджелудочная железа состояла только из двух долей – дорсальной и вентральной, которые между собой не срастались: чаще всего (60,4) сращение было образовано тремя долями: дорсальной, вентральной и средней. На 17 препаратах (32,1 %)оно двумя долями: вентральной и дорсальной, а на четырех препаратах(7,5 %) сращение было образовано вентральной и средней, а дорсальная доля была обособлена. Абсолютная масса сращения у односуточных цыплят составляла 0,01 г, у 525-суточных кур – 0,19 г, длина –6,66 и 11,0 мм, ширина – 2,33 и 6,6 мм, толщина – 0,04 и 8,0 мм, соответственно. На поверхности долей и сращения имелись хорошо очерчённые вторичные дольки, их количество было различным.
Так, вентральная доля имела от 3 до 11 долек, дорсальная – 1-8, средняя – 1-9, селезеночная – 1-4, сращение – 1-3.Гистологические исследования показали. Что поджелудочная железа у вылупившихся цыплят покрыта тонкой соединительной капсулой и имеет отчётливое дольчатое строение. Дольки отделены между собой соединительно-тканными прослойками, состоящими из коллагеновых и эластиновых волокон. Тонкие коллагеновые волокна окутываюти ацинусы. Содержание соединительной ткани у суточных цыплят составляет 27,2 %, а железистой паренхимы – 72,8 %. На долю ацинозной паренхимы приходится львиная доля – 72,1 % и лишь 0,7 % занимает островковая паренхима.
С возрастом это соотношение резко меняется. К 280-дневному возрасту кур содержание железистой паренхимы увеличивается до 95,1 %,причём количество островковой ткани увеличивается в 2,7 раза, а ацинозной – в 1,3 раза. Количество соединительной ткани уменьшается в 5,7 раза. У кур 525-суточного возраста железистая паренхима по сравнению с 1-суточным возрастом увеличивается в 1,27 раза и составляет 92,8 %всей ткани органа. Островковая паренхима за этот период увеличивается в 4,1 раза и составляет 2,9 %
.При изучении морфометрических показателей паренхиматозныхструктур поджелудочной железы было установлено, что у суточных цыплят в поле зрения микроскопа обнаруживается наибольшее количество ацинусов (187,5±7,89), а размер их является наименьшим(12,1±0,56 мкм) со всеми остальными возрастными периодами. Количество ацинусов к 85-дневному возрасту птицы уменьшается до78,83±1,49, а затем постепенно увеличивается до 88,25±0,97 к 525-суточному возрасту. За этот возрастной период размер ацинусов уменьшается с 41,4±1,06 до 30,4±0,83 мкм, а количество ациноцитов –с 12,25±0,48 до 12,17±0,44 штук.
Таким образом, структурные компоненты поджелудочной железы птицы кросса «ИЗА-браун» в течение жизни претерпевают адаптивную перестановку с целью сохранения гомеостаза и жизнедеятельности организма и поддержания оптимального уровня яйценоскости
Источник
Изобретение относится к ветеринарии, а именно к ветеринарным препаратам для лечения и профилактики расстройств пищеварения на основе тканей поджелудочной железы свиней и цыплят-бройлеров. Препарат содержит, мас.%: ткань поджелудочной железы свиней и цыплят-бройлеров 23 — 26; цеолит 66 — 43; глюкоза 1,0 — 1,5; раствора Рингера — остальное. 6 табл.
Изобретение относится к ветеринарии, точнее к ферментным препаратам из ткани поджелудочной железы, усиливающим процессы гидролиза питательных веществ корма в кишечнике при расстройствах пищеварения, возникающих в ранний постэмбриональный период при нарушении технологии кормления, при резкой смене рациона, а также при патологии поджелудочной железы и печени.
Из ферментных препаратов, применяемых в животноводстве широкое распространение в последние годы получили ферменты микробиологического синтеза. Наиболее близкие по действию пищеварительным ферментам являются амилосубтилин ГЗх и протосубтилин ГЗх, которые получают высушиванием на распылительной сушилке культуральной жидкости после глубинного культивирования Бацилюс субтилис. Препараты обладают амилолитической и протеолитической активностью и позволяют снижать затраты кормов на 1 кг прироста на 5-7% повышают среднесуточный прирост на 4-7% Однако указанные препараты имеют существенный недостаток, который по мнению И. В. Петрухина (Корма и кормовые добавки. Справочник. М. Росагропромиздат, 1989. С. 333-345) состоит в следующем. Для животноводства выпускаются в основном неочищенные препараты, содержащие всю гамму вырабатываемых продуцентом ферментов. Такие препараты не свободны от спор продуцента, в препарате остаются остатки питательной среды, пеногаситель, метаболиты и др. вещества, действие которых не изучено. Ни один из этих препаратов, разрешенных к применению в животноводстве, до сих пор не имеет полностью изученного химического состава, не говоря о токсикологической проверке и определении отдаленного действия.
Кроме того, указанные препараты обладают узким спектром действия по сравнению с тканевыми препаратами, содержащими не только пищеварительные ферменты, но и пептиды, гормоны и др. биологически активные вещества. По-видимому, поэтому препараты микробиологи- ческого синтеза не используются в животноводстве с лечебной целью.
Из тканевых препаратов известен энтерофар (кишечная мука), который получают из 12-перстных кишок свиней и крупного рогатого скота. Несмотря на широкий спектр действия данного препарата (антидиарейный и антиперистальтический эффект, улучшение регуляции функции пищеварительной, нервной и эндокринной систем), энтерофар обладает незначительной активностью, поскольку, во-первых, в качестве исходного сырья используется слизистая оболочка кишечника, а, во-вторых, технология приготовления препарата включает варку или автоклавирование сырья в течение 1 ч и сушку при 80оС.
Наиболее близким техническим решением, выбранным в качестве прототипа данного изобретения является панкреатин. Известно, что панкреатин назначается для приема внутрь при расстройствах пищеварения, связанных с недостаточностью секреции поджелудочной железы или нарушениях функции печени (Краткая химическая энциклопедия. Т.3.М. Советская энциклопедия, 1964. С. 853-854). Однако наряду с положительными признаками препарат, на наш взгляд, не лишен недостатков: 1) панкреатин обладает относительно низкой по сравнению с предложенным препаратом амилолитической активностью, а, следовательно, относительно низким (4:1) амилазно-протеазным соотношением; 2) в панкреатине в качестве наполнителя используются дисахариды, которые частично служат субстратом для действия амилазы препарата и не могут повышать активность ферментов.
Целью изобретения является создание, получение и повышение эффективности препарата для лечения и профилактики расстройств пищеварения.
Указанная цель достигается при использовании в качестве источника сырья наряду с поджелудочными железами свиней желез птиц. Поджелудочные железы птиц, например цыплят-бройлеров, составляют 0,29% от живой массы, т.е. около 4-5 г. Однако ферментативная активность ткани поджелудочной железы цыплят-бройлеров 56-дневного возраста несколько выше, чем у свиней (табл.1).
Из данной табл.1 видно, что ткань поджелудочной железы цыплят-бройлеров по протеолитической активности превосходит ткань свиней почти в 3 раза, а по амилолитической активности в 1,3 раза.
Поджелудочные железы, полученные при убое свиней или птиц, очищаются от жира и помещаются в термоконтейнер при охлаждении льдом (температура 0-4оС). Для приготовления препарата ткань измельчается: вначале пропускается через мясорубку, а затем гомогенизируется с помощью гомогенизатора или размельчителя тканей при добавлении 1% от массы ткани глюкозы и 5-10% раствора Рингера. Раствор Рингера состоит, NaCl 0,9; KCl 0,042; CaCl2 0,024; Na2HCO3 0,015. Раствор Рингера используется в качестве разбавителя потому, что обладает способностью стабилизировать ферментативную активность, особенно протеаз панкреатического сока (Батоев Ц.Ж. Об изменениях активности ферментов поджелудочного сока птиц и собаки в зависимости от условий его разбавления//Актуальные вопросы зоологии и физиологии. В.1. Улан-Удэ: 1972, с. 15-19).
1. Активность амилазы устанавливалась по методу Смит-Роя-Уголева (1965) Мерина-Глузкина В.М. Сравнительная оценка сахарифицирующего и дектринирующего методов при определении активности амилазы крови здоровых и больных острым панкреатитом //Лаб.дело, 1965, N 3, с. 142.
2. Протеолитическая активность определялась по методу Батоева Ц.Ж. (1971) Батоев Ц.Ж. Фотометрическое определение активности протеолетических ферментов поджелудочного сока по уменьшению концентрации казеина //Сб.научн. тр. Бурятского СХИ. 1971, N 25, с. 122 и 126.
3. Активность липазы по методу Батоева Ц.Ж. Цыбекмитовой Г.Ц. (1985). Батоев Ц.Ж. Цыбекмитова Г.Ц. Определение активности липазы панкреатического сока по гидролизу подсолнечного масла //Болезни с.-х. животных в Забайкалье и на Дальнем Востоке и меры борьбы с ними. Благовещенск; 1985, с. 70 и 73.
Глюкоза также играет роль стабилизатора биологически активных веществ.
Таким образом, указанные факторы и цеолит позволяют повысить амилолитическую активность препарата, а следовательно, изменить амилазно-протеазное соотношение в сторону его увеличения (20:1). Такое соотношение более физиологично для животных и птиц, так как рацион у них преимущественно углеводные.
В качестве наполнителя панкреаветина используется природный цеолит (размеры частиц до 1,0 мм), который предварительно отмывается от шлаков и просушивается при 105оС в течение 3 ч с целью удаления из него влаги и частичного обезвоживания.
Цеолиты обладают рядом уникальных свойств: ионообмен, сорбция и адсорбция. Что и позволяет считать цеолиты активным наполнителем ферментных препаратов.
1. Цеолиты обеспечивает сокращение срока сушки препарата за счет поглощения воды из ткани и легкой ее отдачи при нагревании. Это имеет немаловажное значение для сохранения активности ферментов.
2. Цеолиты обладают ингибирующим действием по отношению к протеазам поджелудочной железы, что снижает аутолиз в препарате в процессе сушки и хранения.
3. Цеолиты формируют основу препарата, обеспечивая определенную «защиту» биологически активных веществ на первых этапах продвижения по желудочно-кишечному тракту.
4. В пищеварительном канале цеолиты влияют на ионообмен, способны сорбировать вредные для организма газы (NH3), замедляют перистальтику тонкого отдела кишечника и тем самым пролангируют действие панкреатических ферментов на субстрат.
Благодаря наличию указанных свойств, цеолит является важным компонентом, усиливающим эффективность действия препарата.
Цеолит смешивают с измельченной тканью поджелудочной железы в соотношении 1:1, и, разложив тонким слоем в кюветы, сушат в специальной камере при интенсивном движении подогретого до 36-42оС воздуха в течение 1,0-1,5 ч. После чего препарат измельчают с помощью электрической мельницы в порошок и обеззараживают, облучая ртутно-кварцевой лампой в течение 1 ч.
Граничные значения компонентов, при котором достигается цель изобретения, следующие, мас.
Ткань поджелудочной железы свиней или птиц 23-46 Глюкоза (от массы ткани и железы) 1,0-1,5 Раствор Рингера Остальное В полученную смесь вводят природный цеолит в весовом соотношении 1:1-3 Сведения, подтверждающие возможность осуществления изобретения.
1. С целью определения оптимального соотношения ткани поджелудочной железы и цеолита готовили три препарата с соотношением ткани железы и цеолита: 1:1, 1:2, 1:3. Активность ферментов определяли в исходном сырье и в готовом препарате. Данные представлены в табл.2.
Из табл.2 следует, что при соотношении ткани поджелудочной железы и цеолита 1:1 количество ткани железы не превышало 46% а активность ферментов от исходной величины составляла: амилазы 70% и протеаз 60% При соотношении 1:2 ткань поджелудочной железы не превышала 31% от препарата, а ферментативная активность составляла соответственно 22 и 12% При соотношении 1:3 ткань поджелудочной железы составляла 23% а активность феpментов соответственно 22 и 8,5% Таким образом, оптимальным соотношением между тканью поджелудочной железы и цеолитом следует считать 1:1, поскольку лишь в этом случае отмечается достаточно высокий уровень активности ферментов.
2. С целью изучения влияния глюкозы на стабилизацию панкреатических ферментов при сушке препарата готовили панкреаветин с разным содержанием глюкозы. Результаты опыты показаны в табл.3.
Из табл.3 видно, что наибольшая активность амилазы отмечается при добавлении 1,0% глюкозы от массы ткани поджелудочной железы. Высокий уровень протеолитической активности также наблюдается при добавлении 1,0% глюкозы. При увеличении количества глюкозы в препарате следует снижение ферментативной активности.
3. Для сравнения ферментативной активности панкреаветина с другими препаратами были проведены параллельные исследования еще двух известных препаратов: панкреатина и протосубтилина.
Таким образом, панкреаветин значительно превосходит по ферментативной активности протосубтилин и более физиологичен по амилазно-протеазному соотношению для организма животных и птиц, чем панкреатин.
4. Влияние панкреаветина на внешнесекреторную функцию поджелудочной железы цыплят-бройлеров изучали в хронических опытах. Для этого цыплят-бройлеров 40-50-дневного возраста оперировали по методу Батоева Ц.Ж. Батоевой С. Ц. (1970) (Батоев Ц.Ж. и Батоева С.Ц. Методика наложения фистул для изучения секреции поджелудочной железы и желчевыделения у птиц//Физиологический журнал СССР, 1970, т. 56, N 12, с. 1867 и 1868). Указанный метод позволял получать панкреатический сок в период опытов, а в остальное время направлять его в кишечник. Эксперименты проводили методом периодов. Панкреатический сок собирали в течение трех часов, определение его количества и ферментативной активности проводили через каждые 30 мин. После первых 30 мин опыта цыплят кормили. Результаты исследования представлены в табл.5.
Из табл.5 видно, что добавление панкреаветина вызывает усиление, главным образом, протеолитической активности. Так, по сравнению с фоновым периодом активность протеаз в объеме сока за опыт возрастает на 64,2% Наблюдается также повышение сокоотделения и увеличения активности амилазы, но незначительно.
Таким образом, панкреаветин оказывает положительное влияние на внешнесекреторную деятельность поджелудочной железы. Что не может не отразиться на процессах пищеварения в кишечнике.
5. Влияние панкреаветина на процессы пищеварения в кишечнике изучали в хронических опытах на цыплятах-бройлерах 50-60-дневного возраста с фистулой, установленной в 12-перстной кишке. В течение нескольких дней определяли фоновый уровень ферментативной активности дуоденального химуса, а затем добавляли в корм бройлеров панкреаветин в дозе 0,1 г/кг живой массы и вновь исследовали химус. Пробы дуоденального содержимого брали через 30 мин в течение 3 ч. Через 30 мин с начала опыта цыплят кормили.
Наши экспериментальные данные свидетельствуют о том, что препарат в первый день его введения в рацион повышал ферментативную активность химуса.
Из данных табл. 6 видно, что амилазная активность возрастала на 13-59% протеазная на 8-35% а липазы до 23% Причем, наибольшее усиление ферментативной активности наблюдалось у бройлера с исходной низкой активностью дуоденального химуса.
В последующие дни при добавлении указанной дозы в рацион цыплят-бройлеров наблюдалось постепенное снижение ферментативной активности, а к восьмому дню устанавливался уровень, характерный для фонового периода. Снижение активности амилазы и протеаз в химусе ниже исходного уровня к третьему и четвертому дню свидетельствует об избыточном поступлении экзогенных ферментов, которые отрицательно влияют на синтез ферментов поджелудочной железой.
При добавлении панкреаветина в дозе 0,03% от массы корма в рацион цыплят-бройлеров существенно увеличивалось количество панкреатического сока и его ферментативная активность. Так, в первый день использования панкреаветина количество панкреатического сока за опыт возрастает на 24,4% (p < 0,05), активность амилазы повышается на 75,7% (p < 0,01), протеаз -на 78,4 (p 0,001).
Формула изобретения
Препарат для лечения и профилактики расстройств пищеварения на основе ткани поджелудочной железы, отличающийся тем, что в качестве ткани поджелудочной железы препарат содержит ткань поджелудочной железы свиней и цыплят-бройлеров и дополнительно цеолит, глюкозу и раствор Рингера при следующем соотношении компонентов, мас.%: Ткань поджелудочной железы свиней и цыплят-бройлеров — 23 — 46 Цеолит — 66 — 43 Глюкоза — 1,0 — 1,5 Раствор Рингера — Остальное
РИСУНКИ
Рисунок 1, Рисунок 2
Похожие патенты:
Изобретение относится к хирургии и терапии и может быть использовано при лечении сахарного диабета
Изобретение относится к медицине и медицинской промышленности, а именно к способам получения инсулина
Изобретение относится к медицине, а именно к радиологии, и может быть использовано при лечении местных лучевых повреждений , таких как лучевые фиброзы, язвы и др
Изобретение относится к ветеринарии, а именно к способам лечения экспериментального туберкулеза легких у животных
Изобретение относится к медицине, в частности к педиатрии
Изобретение относится к медицине , в частности к способу получения лекарственных средств
Изобретение относится к биотехнологии
Изобретение относится к медицине, в частности к акушерству и гинекологии, и касается лечения послеродовых эндометритов
Изобретение относится к области медицины, а именно к способу получения материала, содержащего бета-клетки поджелудочной железы новорожденных кроликов, и к трансплантологическим методам лечения сахарного диабета, преимущественно инсулинозависимого, путем трансплантации бета-клеток, полученных с использованием феномена их миграции
Изобретение относится к области медицины, и в частности касается лечения хронических заболеваний различной этиологии
Изобретение относится к врачебной деятельности и может быть использовано для лечения больных сахарным диабетом
Изобретение относится к медицине и предназначено для лечения острого деструктивного панкреатита
Изобретение относится к области медицины, а именно к эндокринологии,, и может быть использовано в лечении сахарного диабета
Изобретение относится к медицине и может быть использовано при лечении сахарного диабета 1 типа
Изобретение относится к медицине, точнее к фармацевтической композиции для лечения заболеваний поджелудочной железы и расстройств пищеварения, связанных с заболеваниями печени
Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии, и может быть использовано для лечения больных демиелинизирующими заболеваниями, в частности рассеянным склерозом
Изобретение относится к ветеринарии, а именно к ветеринарным препаратам для лечения и профилактики расстройств пищеварения на основе тканей поджелудочной железы свиней и цыплят-бройлеров
Источник
